你应该了解的BD测试

  对于脉动真空灭菌来说，灭菌程序通常包括：预热—脉动—升温—灭菌—干燥—冷却几个阶段，而对无菌有关键影响的是脉动、升温以及灭菌阶段。脉动阶段是通过真空泵将腔室内的冷空气抽出然后注入纯蒸汽，通常根据工艺开发，脉动一定次数之后可将空气充分移除，然后开始升温。如果在此阶段，冷空气没有被充分的移除，那么有很大的可能性导致灭菌失败，微生物没有被杀灭或者没有到达无菌保证水平，显然这是我们不愿意看到的。

  1963年J.H.Bowie和Mr.J.Dick提出并设计了BD（Bowie and Dick）测试包，用于快速检测灭菌前需要排气的灭菌柜移除冷空气的能力。如果测试卡颜色变色均匀，灭菌参数符合BD测试包要求，则说明灭菌柜能够充分的将冷空气去除，蒸汽能快速地渗透，并且无显著的空气泄漏，原则上这种状态下的灭菌柜是能够适用于正常灭菌工作的，也将提高无菌保证的信心。

  BD测试本质上是蒸汽穿透试验，而不是某温度下的时间试验，如果人为的延长测试时间，在没有充分的移除冷空气的情况下也有一定的可能使测试卡变色均匀。测试结束后，我们不仅仅要查看变色卡是否变色均匀一致，同时也应查看灭菌柜的打印记录，确保BD测试的灭菌柜参数符合BD测试包的要求，否则即使测试卡变色均匀，也是不可接受的。

  BD测试是一种快速的筛查灭菌性能的方法，且由于测试卡是通过人眼进行观察的，这种方法不是定量的方法，因此我们该清楚的知道这种方法是无法代替定期的再确认的。

  对于BD何时来测试，根据目前查询的相关法规、指南、标准等，大部分的要求是在每日正式灭菌之前空载进行。首先来看下法规、指南及标准的要求。

  待灭菌的负载的设计应支持有效排气并利于排水，以防止冷凝水的积聚。2、消毒技术规范2008第5.1.1.4条：

  医院消毒供应中心，第3部分：清洗消毒及灭菌效果监测标准第4.4.2.4节B-D试验：预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌器应每日开始灭菌运行前空载进行B-D测试，B-D测试合格后，灭菌器方可使用。B-D测试失败，应及时查找原因进行改进，监测合格后，灭菌器方可使用。小型压力蒸汽灭菌器的B-D试验应参照GB/T30690。

  5、EN 554欧洲消毒灭菌标准，第6.3.4节如果消毒过程包括空气的排除，那么应在每天开始使用消毒器之前对其进行蒸汽穿透测试。

  用于检查高真空多孔物品本身及其灭菌器腔室内的空气是否成功排除。建议对于灭菌柜进行周期性的BD试验，用于判断灭菌器腔室内的空气的排除效果。

  在这里必须要格外注意的是，灭菌柜使用有两种情况，一种是非连续的，柜子会完全冷却下来；第二种情况是连续的，即柜子没有完全冷却的情况。对药品生产企业来说，通常第一种非连续使用的情况居多。对于第二种情况，连续运行的，要求每天相同时刻进行一次即可。

  可以思考这样一个问题，如果灭菌柜是连续运行的情况，每天不做BD测试风险有多高呢？连续运行情况下，蒸汽供热管道及设备始终处于“热”的状态，设备处在良好的运转状态，实际上此时BD测试就没那么高的必要性了，因此我们也看到指南、标准等中对这种情况做特别的描述比较少。但是为了确认灭菌柜在连续运转之后，还依然能确保性能，因此在每天的相同时刻进行一次即可。

  对于第一种情况，由于蒸汽供热管道以及设备均是冷的，刚开始经过简单的预热之后，即开始做正式的灭菌，这样的一种情况就一定会失败吗？不一定的，BD测试是60年前发明的，我们始终相信现在的设备要比60年前的设备在技术上要先进的多。然而设备冷启动之后就进行正式灭菌，这种失败的风险（或者说概率）还是很高的，如果出现问题，不仅仅需要重新灭菌，对于有些物品有可能不可以进行多次灭菌使用而浪费，比如胶塞。同时灭菌失败的物品用于无菌产品，很有可能污染产品，甚至给患者带来安全隐患。

  对于停机很长时间以后的设备（冷柜子）在正式灭菌之前进行一次BD测试，按照WS/T 367-2012附录A的要求，如果BD测试时测试卡变色均匀一致，灭菌记录参数符合标准要求，则说明BD试验通过，能够直接进行正常的灭菌使用；如果变色不均匀，说明BD测试失败，可重复一次BD测试，合格，灭菌能够正常的使用，不合格，需检查BD测试失败原因，直接BD测试通过后该灭菌柜方能使用。

  GMP的主旨是最大限度的降低污染、交叉污染，混淆与差错，基于以上概述，对于不连续的脉动真空灭菌柜在使用之前进行BD测试还是很有必要的，因为真正重要的是后续每批次物品的灭菌。

  在ISO 17665.2-2009中对于BD测试的描述，我们注意到一个词“the small load”小装载，我们大家都知道对于灭菌柜存在“小装载效应”，较少的装载，有可能导致包裹内的冷空气移除不充分，WS 310中也有类似的要求，每日真正开始前空载进行BD测试。

  BD测试与真空泄漏测试似乎很多人也经常搞混，J.H.Bowie在文献中也提到，BD测试通过表明了有足够的蒸汽穿透，但不一定气密性符合标准要求，因此可能还需要必要的真空测试，因为微小的泄漏可能不会导致BD测试失败，但抽真空时会将外界的污染物吸入灭菌柜中污染被灭菌物品，目前也有企业每天在进行BD测试之前先进行一次真空泄漏测试。