【验证专题】干货：湿热灭菌验证及灭菌柜过程需要注意的几点！

  湿热灭菌，这可是灭菌界的大明星呢！它的秘密武器就是脉动真空灭菌器。这家伙的工作原理就像是一个高级版的吸尘器，先把灭菌柜室里的冷空气抽走，让它变成负压状态，然后灌入饱和纯蒸气，反复这么操作，高温度高压力下，微生物的蛋白质就变得软趴趴的，彻底掉了！灭菌完成后，再抽真空，让物品迅速变干。这种方法方便、省时、省力，总的灭菌时间短，灭菌效果杠杠的，而且物品干燥得快。

  湿热灭菌柜的相关法规也是相当严谨的哦！首先，任何灭菌工艺在投入到正常的使用中前，都要用物理检测和生物指示剂来验证它的适用性和灭菌效果。其次，每年都要定期对灭菌工艺进行再验证，设备有大改动后更要重新验证。还要确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。使用生物指示剂时，要严格按照供应商的要求保存和使用，并通过阳性对照试验确认其质量。

  《中国药典》也规定了灭菌法的验证是无菌保证的必要条件。验证内容有：制定验证方案和评估标准、确认设备的设计与选型、确认设备资料齐全、安装正确并能正常运行、确认关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行等等。还要采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确保各关键工艺参数符合预定标准。最后，要汇总各种文件和记录，撰写验证报告。

  任何灭菌工艺在投入到正常的使用中前， 一定要采用物理检验测试手段和生物指示剂， 验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。

  应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次） 。设备重大变更后， 须进行再验证。 应当保存再验证记录。

  应当按照供应商的要求保存和使用生物指示剂， 并通过阳性对照试验确认其质量。 使用生物指示剂时， 应当采取严格管理措施， 防止由此所致的微生物污染。

  灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件。 灭菌工艺经验证后，方可交付正式使用。 验证内容包括：

  (4) 确认灭菌设备、 关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行。

  (5) 采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确认各关键工艺参数符合预定标准， 确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定。

  (6) 汇总并完善各种文件和记录， 撰写验证报告。 灭菌工艺的日常监控:

  同时应持续评估灭菌工艺的有效性及被灭菌物品的安全性和稳定能力， 并建立相应的变更和偏差控制程序， 确保灭菌工艺持续处于受控状态。 灭菌工艺应定时进行再验证。 当灭菌设备或程序发生变更(包括灭菌物品装载方式和数量的改变） 时， 应进行重新验证。

  湿热灭菌还有一个特别之处，就是过度灭菌法。对于耐热性良好的物品，我们一般会使用这样的解决方法。就像是给微生物来个“大保健”，让它们彻底放松，无法复活！使用过度杀灭法的目标是确保达到某些特定的程度的无菌保证，而不管装载物的实际负载生物的数量多少和耐热性如何。这种方法就像是用大炮打蚊子，虽能确保蚊子都，但也可能把周围的一切都打得稀巴烂。

  湿热灭菌（残存概率法）就像是用热水洗澡，虽能杀死大部分细菌，但对于不耐热的产品来说，可能会造成不可接受的降解。所以，灭菌程序的确认就需要研究产品的微生物数量和耐热性。一旦确定了这一些因素，就可以设计出一个能达到PNSU为10-6 的灭菌程序。

  湿热灭菌柜验证就像是通过一系列验证试验来找到有效合理的灭菌参数，并把已经验证过的灭菌设备和灭菌工艺参数应用到药品生产的除菌过程中去。这样做的目的是证明用于药品生产的全部过程中的每一台蒸汽灭菌设备都能起到灭菌的效果，并且对不同灭菌物品的灭菌过程和灭菌效果具有可靠性和重现性。

  3Q（安装确认、运行确认、性能确认）就像是对供应商所供技术资料的核查，对设备、备品备件的检查验收以及设备的安装检查。这样做的目的是确保设备符合 GMP、厂商的标准及企业特定技术要求。

  运行确认就像是通过按草拟的标准操作规程进行单机或系统的运行试验，俗称试车。这样做的目的是证明设备或系统各项技术参数能否达到设定要求。

  性能确认就像是对设备做一系列的测试，包括真空泄漏检测、BD 测试、空载热分布和负载热穿透等。这些测试的目的是确保设备能战场工作，并且对不同物品的灭菌效果具有可靠性和重现性。一般来说，生物指示剂应该贴近温度探头放置，以便来评估生物热致死率与基于热输入而预测得出的热致死率之间的关系。当确定了难灭菌的物品后，就必须格外的注意这些难灭菌物品（过滤器、填充材料、泵等）的灭菌情况。此外，还必须格外的注意紧紧包裹的地方、厚厚打包的物品、考虑安全而系得很紧的材料、非常长的管子等等。

  生物指示剂以及温度探头的位置应该被记录在验证记录中。根据验证中的装载形式，用来指导并应该记录后续生产的所有批次的装载情况。

  1. 热电偶连接点不要接反，应为红线接(-)蓝线接(+),否则屏幕显示数据与现实温度相反；

  2. 一些热电偶有外皮包裹，需在末端把外皮破开，防止蒸汽冷凝水进入SIM盒；

  4. 保存数据时如果平板卡死，无法连接主机，应使用U盘插入Kaye机主机，按U盘旁按键进行数据保存，将U盘数据导入平板内会增加新的测试数据；

  5. 布点时热分布探头应注意垂直朝上，避免冷凝水掉落至探头顶端 ,造成数据不合格；